Thủ Thuật Hướng dẫn Có bao nhiêu loại enzyme cắt số lượng giới hạn Chi Tiết

Quý khách đang tìm kiếm từ khóa Có bao nhiêu loại enzyme cắt số lượng giới hạn được Update vào lúc : 2022-11-03 11:00:00 . Với phương châm chia sẻ Thủ Thuật về trong nội dung bài viết một cách Chi Tiết Mới Nhất. Nếu sau khi tìm hiểu thêm nội dung bài viết vẫn ko hiểu thì hoàn toàn có thể lại phản hồi ở cuối bài để Tác giả lý giải và hướng dẫn lại nha.

Enzyme cắt số lượng giới hạn là gì?

Enzyme cắt số lượng giới hạn (restriction endonuclease) hay gọi tắt là enzyme số lượng giới hạn (restrictase) là loại enzyme hoàn toàn có thể nhận ra đoạn trình tự nucleotide đặc hiệu trên những phân tử DNA và cắt cả hai sợi DNA tương hỗ update tại những vị trí đặc trưng.

Vai trò của những enzyme cắt số lượng giới hạn

Từ 1953 người ta đã phát hiện thấy rằng, khi đưa DNA của một nòi vi trùng E. coli này vào tế bào thuộc một nòi khác thường thì DNA được đưa vào, gọi là DNA ngoại lai hay DNA lạ, mất hẳn hoạt tính di truyền và hầu như bao giờ cũng trở nên phân cắt thành những đoạn ngắn. Chỉ trong một số trong những ít trường hợp DNA lạ đó mới không biến thành phân cắt và do đó nó hoàn toàn có thể tái bản trong tế bào chủ. Điều đó chứng tỏ DNA lạ được sửa đổi bằng phương pháp nào đó dưới sự kiếm soát của tế bào chủ. Các hiện tượng kỳ lạ nói trên xẩy ra hầu hết khi những thể thực khuẩn (phage) xâm nhiễm những tế bào vi trùng.

Cho đến đầu thập niên 1970 người ta mới biết rõ rằng những tế bào vi trùng là những khối mạng lưới hệ thống chứa cả hai loại enzyme: những enzyme sửa đổi và những enzyme cắt số lượng giới hạn. Chúng đều phải có đối tượng người dùng nhận ra là những đoạn trình tự của DNA vật chủ và DNA ngoại lai, nhưng có vai trò rất khác nhau.

Cụ thể, những enzyme sửa đổi (methylase) đóng vai trò bảo vệ DNA vật chủ bằng phương pháp gắn thêm nhóm methyl (-CH3) ở một số trong những base nhất định trong đoạn nhận ra (recognition sequence) hay đoạn đích (target sequence).

Hiện tượng methyl hoá (methylation) này thường xẩy ra riêng với adenine và biến hóa nó thành N-6 methyladenine. Trong khi đó, những enzyme số lượng giới hạn lại đóng vai trò vô hiệu hoá hoạt tính di truyền của những DNA lạ bằng phương pháp phân cắt ở những vị trí đặc trưng chừng nào nó không được sửa đổi cho giống với DNA vật chủ. Như vậy, những enzyme số lượng giới hạn đóng vai trò là hàng rào bảo vệ tự nhiên của những vi trùng nhằm mục đích chống lại sự xâm nhập của những phage lạ.

Tính chất chung của những enzyme số lượng giới hạn

Trước tiên, cần lưu ý rằng những enzyme số lượng giới hạn chỉ phát hiện thấy ở những vi trùng mà không còn ở những eukaryote. Vì vậy, tên thường gọi của những enzyme số lượng giới hạn thông dụng là tên thường gọi khối mạng lưới hệ thống, được biểu thị bằng ba hoặc bốn vần âm viết tắt của vi trùng mà từ đó enzyme được chiết xuất. Chữ cái thứ nhất được viết hoa để chỉ chi (genus) và hai vần âm tiếp theo viết thường để chỉ loài (species), và khi thiết yếu thêm vần âm thứ tư để chỉ nòi hoặc chủng (strain, type). Ngoài ra, để phân biệt những enzyme cùng một nòi người ta dùng số La Mã kèm theo sau tên khối mạng lưới hệ thống (xem bảng 10.1).
Enzim số lượng giới hạn

Tính chất quan trọng nhất của những enzyme số lượng giới hạn là tính đặc hiệu vị trí, nghĩa là chúng hoàn toàn có thể nhận ra đoạn trình tự DNA đặc trưng để cắt ở vị trí xác lập. Tuỳ theo vị trí cắt so với đoạn nhận ra mà chia ra hai loại: loại I gồm có những enzyme số lượng giới hạn cắt bên phía ngoài phạm vi đoạn nhận ra và loại II gồm có những enzyme cắt đặc hiệu bên trong đoạn nhận ra. Ở đây toàn bộ chúng ta chỉ xét những enzyme số lượng giới hạn loại II vốn sẽ là công cụ hiệu năng (in như con dao mổ tinh vi) được cho phép thao tác trên những gene trong kỹ thuật DNA tái tổng hợp (hình 10.1).
Eim số lượng giới hạn 2

Đặc trưng nổi trội của những đoạn đích là có kích thước ngắn, 4-8 cặp base, và có tính đối xứng xuôi ngược (palindrome).

Nhìn chung, những enzyme số lượng giới hạn rất khác nhau có hai kiểu cắt sau này: cắt lệch và cắt thẳng. Với kiểu cắt lệch tức là những vị trí cắt trên hai sợi của DNA sợi kép là so le, tạo ra những đoạn DNA có những đầu sợi đơn gồm một số trong những base tương hỗ update gọi là những đầu dính (cohesive/sticky ends). Các enzyme số lượng giới hạn như vậy có vai trò to lớn trong việc kiến thiết DNA tái tổng hợp in vitro (hình 10.1). Điển hình ở đấy là EcoRI và BamHI (bảng 10.1). Với kiểu cắt thẳng, tức cắt cùng vị trí trên cả hai sợi của DNA sợi kép, do đó tạo ra những đoạn DNA có những đầu bằng (blunt ends); ví dụ, SmaI…(bảng 10.1).

Các enzyme số lượng giới hạn rất khác nhau có đoạn đích giống nhau, tuy nhiên vị trí và kiểu cắt hoàn toàn có thể giống hoặc rất khác nhau, gọi là những enzyme số lượng giới hạn tương ứng (isoschizomers); ví dụ, SmaI và XmaI (bảng 10.1).

://.youtube/watch?v=wKdNh80Tx-U

4580

Video Có bao nhiêu loại enzyme cắt số lượng giới hạn ?

Bạn vừa đọc nội dung bài viết Với Một số hướng dẫn một cách rõ ràng hơn về Clip Có bao nhiêu loại enzyme cắt số lượng giới hạn tiên tiến và phát triển nhất

Share Link Tải Có bao nhiêu loại enzyme cắt số lượng giới hạn miễn phí

Quý khách đang tìm một số trong những ShareLink Tải Có bao nhiêu loại enzyme cắt số lượng giới hạn miễn phí.

Thảo Luận vướng mắc về Có bao nhiêu loại enzyme cắt số lượng giới hạn

Nếu sau khi đọc nội dung bài viết Có bao nhiêu loại enzyme cắt số lượng giới hạn vẫn chưa hiểu thì hoàn toàn có thể lại Comments ở cuối bài để Admin lý giải và hướng dẫn lại nha
#Có #bao #nhiêu #loại #enzyme #cắt #giới #hạn